乐孕途
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时间：2021-08-18 11:18:50 浏览：674次
一种建立不依赖于饲养细胞的人类胚胎干细胞的新方法（⬅点击左侧文字观看视频）
研究问题：是否有一种直接从人类胚泡中建立人类胚胎干细胞的有效方法，而不依赖于饲养细胞？
简要回答：我们建立了一种新的方法，直接从人类胚泡中产生人类胚胎干细胞，而不依赖于饲养层细胞。
已经知道的是：建立胚胎干细胞系主要需要将ICM束与饲养细胞（如小鼠或人类成纤维细胞）共培养，这带来了潜在的异质性污染。尽管有一些关于产生独立于饲养细胞的人类ESC的报告，但效率低，条件培养基不稳定，存在生物污染。
研究设计、大小、持续时间：我们使用了10个来自我们生殖中心的5/6天捐献的人类囊胚，其中大多数是PGT诊断异常的遗传病胚胎。建立ESCs程序后，对所有细胞系进行多能性和分化潜能测试，计算系统的成功率，并与常规方法进行比较。
参与者/材料、设置、方法：简言之，使用显微操作系统机械分离ICM团块，然后将其转移至经geltrex（1:100稀释）基质预处理的30ul mTESR plus培养基液滴中，氧浓度为5%。当细胞附着和迁移时，我们还使用激光破坏剩余的滋养层细胞。大约10天，典型的ES克隆可以机械传代，传代2后细胞可以在正常氧气浓度下培养。
主要结果和机会的作用：利用这种方法，我们成功地从捐献的人类囊胚中建立了9个胚胎干细胞系，成功率为90%（9/10）。各细胞系均通过胚胎干细胞鉴定试验。与传统的饲养细胞依赖方法相比，我们的novol方法不仅消除了异质细胞的污染，而且成功率更高（90%比25%）。
局限性，谨慎的理由：由于捐赠的人类囊胚很少，本实验是一个单中心小样本实验。
研究结果的更广泛含义：我们推测培养皿、基质和培养基的批次差异可能会影响建立效率，如何开展高水平的质量控制工作可能是保持系统稳定的关键因素。
试验注册号：基础研究